产品货号：
MT0136
中文名称：
探针法荧光定量PCR冻干试剂盒
英文名称：
Lyophilized Fast DNA TaqMan PCR Kit
产品规格：
20μL×200T|20μL×1000T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是采用TaqMan探针法进行实时荧光定量PCR的专用试剂，适合于FAM/HEX/TET/JOE/ROX等双标记探针（本品也适用于Molecular Beacon探针），广泛应用于DNA和cDNA的相对定量检测等。
本试剂盒中的TaqMan PCR Reagent为冻干试剂，将热启动Fast Taq DNA聚合酶、dNTP等做成冻干品试剂，制品性能稳定，可长期保存。当加入2×TaqMan Buffer溶解后，试剂变为常规TaqMan PCR Mix单组分预混试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、探针、DNA或cDNA模板、水即可。该制品不含有ROX校正染料，适用于适合于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量PCR机型。
本试剂盒中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性，因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度，因此满足快速PCR程序，通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力，同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。
试剂盒特点：
· 热启动酶采用专有的修饰方式，30s热启动；
· 干粉制品，性能及其稳定；
· 卓越的扩增性能，耐受样本中的杂质能力强；
· 高灵敏度，可检测低丰度基因；
· 适用于所有实时定量PCR仪器。
试剂盒组成：
保存条件：RT，有效期一年。
反应实例：
以人A549细胞提取的总RNA（0.64pg-10ng）为模板进行反转录，反转录后分别取2μl cDNA产物，应用本制品进行qPCR，1-8RNA模板分别为：10ng、2ng、0.4ng、0.08ng、16pg、3.2pg、0.64pg和H2O。
A：扩增曲线；
B：标准曲线。
使用方法：
1.溶解冻干制品
每瓶中加入1ml TaqMan PCR Buffer 5溶解冻干品，溶解后的制品为2倍浓度的TaqMan PCR Mix试剂（2×TaqMan PCR Mix）。溶解后的剩余试剂可置于-20℃保存，下次实验融化后直接使用即可。
2.配置反应体系
按照如下组分配制20μl PCR反应体系
注意：通常使用0.4μl的扩增引物可获得理想的扩增结果，必要时可在0.2~0.8μl之间进行调整。在双探针检测时通常探针用量减半，扩增引物浓度保持不变。
3.进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
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本试剂盒中的TaqMan PCR Reagent为冻干试剂，将热启动Fast Taq DNA聚合酶、dNTP等做成冻干品试剂，制品性能稳定，可长期保存。当加入2×TaqMan Buffer溶解后，试剂变为常规TaqMan PCR Mix单组分预混试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、探针、DNA或cDNA模板、水即可。该制品不含有ROX校正染料，适用于适合于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量PCR机型。
本试剂盒中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性，因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度，因此满足快速PCR程序，通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力，同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。
试剂盒特点：
· 热启动酶采用专有的修饰方式，30s热启动；
· 干粉制品，性能及其稳定；
· 卓越的扩增性能，耐受样本中的杂质能力强；
· 高灵敏度，可检测低丰度基因；
· 适用于所有实时定量PCR仪器。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| Lyophilized Fast DNA TaqMan PCR Reagent | 2瓶 |
| 2×TaqMan PCR Buffer5 | 1ml×2 |
保存条件：RT，有效期一年。
反应实例：
以人A549细胞提取的总RNA（0.64pg-10ng）为模板进行反转录，反转录后分别取2μl cDNA产物，应用本制品进行qPCR，1-8RNA模板分别为：10ng、2ng、0.4ng、0.08ng、16pg、3.2pg、0.64pg和H2O。
A：扩增曲线；
B：标准曲线。
使用方法：
1.溶解冻干制品
每瓶中加入1ml TaqMan PCR Buffer 5溶解冻干品，溶解后的制品为2倍浓度的TaqMan PCR Mix试剂（2×TaqMan PCR Mix）。溶解后的剩余试剂可置于-20℃保存，下次实验融化后直接使用即可。
2.配置反应体系
按照如下组分配制20μl PCR反应体系
| 成分 | 用量 | 终浓度 |
| 2×TaqMan PCR Mix（溶解后） | 10μl | 1× |
| PCR Forward Primer (10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| PCR Reverse Primer (10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| TaqMan Probe (10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| cDNA或DNA模板 | 0.5~2μl | |
| ddH2O | up to 20μl |
注意：通常使用0.4μl的扩增引物可获得理想的扩增结果，必要时可在0.2~0.8μl之间进行调整。在双探针检测时通常探针用量减半，扩增引物浓度保持不变。
3.进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 95℃ | 30s | 1 |
| 95℃ | 5s | 40 |
| 60℃ | 20s |
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